Основа Тетратионатного бульона Мюллера-Кауфмана используют для эффективного обогащения и выделения сальмонелл.
Состав**:
Ингредиенты |
грамм/литр |
Гидролизат казеина |
7,00 |
Папаиновый перевар соевой муки |
2,30 |
Натрия хлорид |
2,30 |
Кальция карбонат |
25,00 |
Натрия тиосульфат |
40,70 |
Ox bile (препарат желчи очищенной) |
4,75 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 82,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Охладить и непосредственно перед употреблением асептично добавить 19 мл раствора йода (20,0 г йода и 25,0 г калия йодида в 100 мл стерильной дистиллированной воды) и 9,5 мл 0,1%-ого раствора бриллиантовой зелени. Перед розливом в стерильные пробирки тщательно перемешать для равномерного распределения частиц карбоната кальция.
Принцип и оценка результата:
Этот бульон первоначально был разработан Мюллером (1), а затем модифицирован Кауфманом (2, 3) и рекомендован специалистами АРНА (4) для обогащения и выделения сальмонелл.
Кауфман предложил ввести бриллиантовый зеленый и препарат желчи (Ox bile) для подавления роста комменсалов и более эффективного выделения сальмонелл. Бриллиантовый зеленый добавляют после нагревания среды, так как оно снижает его селективные свойства. Для подавления роста протеев (5) можно добавить в среду 4 мг/л антибиотика новобиоцина.
Гидролизат казеина и папаиновый перевар соевой муки содержат важнейшие питательные вещества для роста бактерий.
Примерно 10,0 г исследуемого образца вносят в 100 мл бульона, тщательно встряхивают и помещают флакон в водяную баню при 45°С на 15 минут. Затем флаконы переставляют в термостат или водяную баню при 43°С. Через 18-24 и 48 часов инкубирования делают высевы на модифицированный агар с бриллиантовым зеленым (М016).
Данная среда не подходит для роста Salmonella typhi, Salmonella pullorum и некоторых других сальмонелл.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий кремовый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
При добавлении бриллиантового зеленого и раствора йода среда становится светло-зеленой, опалесцирует, имеет выраженный белый преципитат.
Культуральные свойства:
Ростовые Характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 43°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) |
Рост |
Salmonella typhimurium (14028) |
Обильный |
Salmonella enteritidis (13076) |
Обильный |
Salmonella paratyphi A |
Обильный |
Salmonella paratyphi B |
Обильный |
Escherichia coli (25922) |
Слабый или отсутствует |
Proteus vulgaris (13315) |
Слабый или отсутствует |
Salmonella typhi (6539) |
Подавляется |
Shigella flexneri (12022) |
Подавляется |
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить не рекомендуется.
02.04.2020
Телескоп Hubble нашел источник, который может оказаться черной дырой промежуточной массы — редчайшей находкой на звездном небе. Сравнительно небольшие черные дыры звездной массы образуются в результате коллапса крупных звезд; огромные сверхмассивные черные дыры растут в центрах целых галактик. Но ...
02.04.2020
Исследование метеоритов показало, что Марс «унаследовал» свои запасы воды как минимум от двух очень разных небесных тел. Подробное описание анализа опубликовал журнал Nature Geoscience.   ...
31.03.2020
Новые исследования показывают, что светящиеся рентгеновские лучи вокруг далеких галактик не могут исходить от частиц темной материи. Таинственное свечение не проявилось в гало темной материи вокруг Млечного Пути, — пишет sciencenews .org со ссылкой на Science. Ученые предположи ...